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您是否 get 到了细胞系鉴定的新技能!!!

发布时间:2018-12-14

很多生物医药的研究都采用培养细胞来进行, 这些细胞可能是从细胞库 (如美国 ATCC,American Type Culture Collection) 得来,也可能是受赠于其它研究人员,尤其在中国,目前细胞的传播太复杂,无序,很多都不是通过正规途径获得,如友情赠送等。
 

据统计,约有 30% 细胞系被交叉污染或错误辨识,因使用了交叉污染或错误辨识的细胞会导致研究结论错误、结果不可重复、临床细胞治疗失败等。不仅浪费大量时间、精力和金钱,还可能造成不可挽回的灾难性后果。为此,很多细胞库现在都要对提交来的细胞系进行鉴定,并对细胞系之间的交叉污染进行监测。


细胞系鉴定方法
 

细胞培养中可以使用许多方法对交叉污染进行鉴定,如同功酶分析、染色体组分型、人淋巴细胞抗原 (HLA) 分型和扩增片段长度多态性 (AFLP) 的特征分析、STR 分析等。
 

近年来,大量研究表明 STR 基因分型方法是进行细胞交叉污染和性质鉴定的最有效和准确的方法之一,STR 基因分型已经被 ATCC 等细胞库组织作为金标准应用于细胞系鉴定 (ANSI/ATCC ASN-0002-2011)。美国的 ATCC 细胞库、德国的 DSMZ 细胞库以及日本的 JCRB 细胞库等为 STR 分型提供了各细胞株的数据供比对。
 

STR 基因位点由长度为 3~7 个碱基对的短串联重复序列组成,这些重复序列广泛存在于人类基因组中,可作为高度多态性标记,被称为细胞的 DNA 指纹,其可通过一定的计算方法,即可根据所得的 STR 分型结果与专业的细胞 STR 数据库比对从而推算出样品所属的细胞系或可能的交叉污染的细胞系名称。

 

STR 鉴定的试验流程
 

细胞 DNA 提取——多色荧光体系复合扩增——DNA  pian段分离荧光信号检测——数据分析得到的基因分析和图谱——与数据库对比和结果分析——出具数据报告

 

看到这里,您是否 get 到了细胞系鉴定的新技能,迫不及待想看看自己冰箱里的细胞系还是不是当初的那个她呢?